离子交换树脂柱吸附氨基酸-阳离子交换树脂吸附氨基酸
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1、用强酸性阳离子交换树脂分离氨基酸混合物时,为什么要逐步提高洗脱液的pH...
反之阳离子交换基质结合带有正电荷的蛋白质,结合的蛋白可以通过逐步增加洗脱液中的盐浓度或是提高洗脱液的pH值洗脱下来。
大部分偏酸性,可能是部分氢离子置换下来导致偏酸性,也可能是置换得到的强酸弱碱盐导致偏酸性,具体问题具体分析。
本实验用磺酸阳离子交换树脂分离酸性氨基酸(天冬氨酸)、中性氨基酸(丙氨酸)碱性氨基酸(赖氨酸)的混合液。在特定的pH条件下,它们解离程度不同,通过改变脱液的pH或离子强度可分别洗脱分离。
氨基酸与阳离子交换树脂作用力的大小次序是碱性氨基酸中性氨基酸酸性氨基酸。溶液的pH高于等电点时氨基酸带正电,低于等电点时氨基酸带负电。选项中Arg(pI为10.76)所带正电荷最多,与交换树脂亲和力最强,后被洗脱。
除了洗脱顺序外,还需考虑其他因素对阳离子交换层析的影响。例如,洗脱缓冲液的pH值、离子强度和浓度等,都会影响氨基酸与阳离子交换树脂的相互作用。此外,树脂的类型、粒径和容量等也会对分离效果产生影响。
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