离子交换树脂分离溶菌酶,离子交换树脂溶解
大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于离子交换树脂分离溶菌酶的问题,于是小编就整理了5个相关介绍离子交换树脂分离溶菌酶的解答,让我们一起看看吧。
1、724树脂分离纯化溶菌酶的原理
采用了离子交换技术。树脂吸附溶菌酶的原理是采用了离子交换技术。溶菌酶是可以作用于微生物细胞壁的水解酶,许多抗生素都具有溶菌酶的作用。
溶菌酶在等电点以下较广泛的pH值范围内,分子带正电荷,可吸附于弱酸性阳离子交换树脂上,洗脱后盐析,可得溶菌酶沉淀,再进行精制可得成品。
因为卵清蛋白的等电点是7,为了提纯溶菌酶,要将卵清蛋白沉淀,所以要把PH调到7,至于0,这是溶菌酶的最适PH值。
【答案】:溶菌酶能肽聚糖中G-M-G处断裂,每隔6个左右断裂一次。青霉素能抑制转肽酶的活性,使G 中的短腻不能交联,低渗使细胞膜破裂而死亡。所以青霉素只作用在正在迅速繁殖的细胞中。
酶的分离纯化一般包括三个基本步骤:即抽提、纯化、结晶或制剂。
2、树脂吸附溶菌酶的原理
溶菌酶分离纯化原理: 等电点法利用溶菌酶等电点较高,在酸性条件下除去一些杂蛋白,阳离子树脂柱层析法进一步除去杂蛋白。
因为交换树脂所以钠型树脂更易与溶菌酶交换。
溶菌酶是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶,又叫胞壁质酶。溶菌酶是采用生物工程技术进行克隆、提取而制取,以蛋清为原料,在pH5条件下用弱酸性阳离子交换树脂732吸附后,再用硫酸铵洗脱,经透析后冷冻干燥得产品。
溶菌酶在等电点以下较广泛的pH值范围内,分子带正电荷,可吸附于弱酸性阳离子交换树脂上,洗脱后盐析,可得溶菌酶沉淀,再进行精制可得成品。
3、溶菌酶的生产
由细胞核糖体合成的,再由内质网包裹为溶菌酶体。利用蛋白质和酶的生物学特异性,即蛋白质或酶与其配体之间所具有的专一性亲和力而设计的色谱技术。酶一底物复合物形成之后,在一定的条件下分离复合物便得到纯净的酶。
以蛋清为原料,在pH5条件下用弱酸性阳离子交换树脂732吸附后,再用硫酸铵洗脱,经透析后冷冻干燥得产品。
溶菌酶广泛存在于鸟类、 家禽的蛋清中和哺乳动物的泪液、 唾液、 血浆、 乳汁、 胎盘以及体液、 组织细胞内,其中在蛋清中含量最丰富 (约 0.3% )。
溶菌酶是采用生物工程技术进行克隆、提取而制取,它是一种天然酶,安全绿色的添加剂,无抗药性。
溶菌酶是潘氏细胞产生的。潘氏细胞是小肠腺的特征性细胞,溶菌酶是能水解致病菌中黏多糖的`碱性酶,主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸以及N-乙酰氨基葡糖之间的β-1等,最终导致细菌溶解。
4、食盐盐析法与离子交换法提取溶菌酶哪种效率高
离子交换法收率高。根据论文《用食盐盐析和离子交换法从鸡蛋清中提取溶菌酶及其比较》得出,离子交换法收率高。
即767克/升;0度时饱和溶解度为9M,即676克/升),在这一溶解度范围内,许多蛋白质和酶都可以盐析出来;另外硫酸铵分段盐析效果也比其他盐好,不易引起蛋白质变性。
分离和提纯蛋白质的方法有盐析法、离子交换法、凝胶色谱法。盐析法:盐析法是一种常用的蛋白质分离方法,原理是向蛋白质溶液中加入高浓度的盐溶液,使蛋白质的溶解度降低,从而从溶液中析出。
酶法 如用溶菌酶破坏微生物细胞等。(二) 蛋白质的抽提 通常选择适当的缓冲液溶剂把蛋白质提取出来。抽提所用缓冲液的pH、离子强度、组成成分等条件的选择应根据欲制备的蛋白质的性质而定。
超声波法 使用超声波震荡器使细胞膜上所受张力不均而使细胞破碎。 酶法如用溶菌酶破坏微生物细胞等。(二) 蛋白质的抽提 通常选择适当的缓冲液溶剂把蛋白质提取出来。
5、食盐盐析法与离子交换法提取溶菌酶哪种收率高?
用等电点沉淀法、盐析法所得到的蛋白质一般含有其他蛋白质杂质,须进一步分离提纯才能得到有一定纯度的样品。常用的纯化方法有:凝胶过滤层析、离子交换纤维素层析、亲和层析等等。
二)有机溶剂提取法 一些和脂质结合比较牢固或分子中非极性侧链较多的蛋白质和酶,不溶于水、稀盐溶液、稀酸或稀碱中,可用乙醇、丙酮和丁醇等有机溶剂,它们具的一定的亲水性,还有较强的亲脂性、是理想的提脂蛋白的提取液。
废酸中的有机杂质一般在制得硫酸铵后除去,脱除杂质的方法主要有萃取法、氧化法、盐析法、凝聚法和离子交换法等。
如离子交换法,电泳法,等电聚焦法。(3)根据分子极性大小及溶解度不同进行分离。如溶剂提取法,逆流分配法,分配层析法,盐析法,等电点沉淀法,及有机溶剂分级沉淀法。(4)根据物质吸附性质的不同进行分离。如选择性吸附法与吸附层析法。
到此,以上就是小编对于离子交换树脂分离溶菌酶的问题就介绍到这了,希望介绍关于离子交换树脂分离溶菌酶的5点解答对大家有用。
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