离子交换树脂洗脱曲线,离子交换树脂脱盐原理
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1、求问怎么用离子交换树脂层析分离混合氨基酸
用阳离子交换层析20种氨基酸的方法如下:疏水性氨基酸的洗脱顺序 在阳离子交换层析中,疏水性氨基酸(如亮氨酸、异亮氨酸、频氨酸等)往往具有较强的亲水性,因此它们在洗脱过程中。
离子交换层析技术已广泛用于各学科领域。在生物化学及临床生化检验中主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质,也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。
用强酸性阳离子交换树脂分离氨基酸混合物时,氨基酸都是以阳离子的形式,被吸附到树脂的离子交换位上。
离子交换层析法大致分为5个步骤:离子扩散到树脂表面。离子通过树脂扩散到交换位置。在交换位置进行离子交换;被交换的分子所带电荷愈多,它与树脂的结合愈紧密,也就愈不容易被其它离子取代。
2、弱酸性阳离子交换树脂滴定曲线
与酸碱滴定曲线的原理相同,但由于树脂存在一个平衡的问题,所以实际上不是直接滴定,而是加入一定量的酸碱浸泡平衡。
曲线的起点决定于被滴定物质的性质和浓度,一般被滴定物质的浓度越高,滴定曲线的起点越低。滴定开始时,加入滴定剂引起的浓度及相关参数变化比较平缓。其变化的速度与被滴定物质的性质或滴定反应平衡常数的大小有关。
滴定过程中pH变化, 可以通过酸碱滴定的滴定曲线(pH~V 曲线)显示出来。1)强碱滴定强酸:滴定曲线,滴定突越范围大,可以准确滴定。2)强碱滴定弱酸:滴定曲线,滴定突越范围小,有些,是可以准确滴定的 。
弱酸阳离子交换树脂在水中的特性类似弱酸。它与中性盐类作用的能力较弱(例如SO42—、CL—等强酸阴离子)。它仅能与弱酸性盐类(具有碱度的盐类)反应,反应后产生的是弱酸。
3、蛋白质水解产物阳离子交换柱层析时的洗脱顺序?
阳离子交换柱层析的洗脱顺序包括:酸性洗脱、碱性洗脱、盐洗脱、温度洗脱和溶剂梯度洗脱。酸性洗脱:酸性洗脱是在酸性条件下进行,此时阳离子交换树脂上的阳离子被酸性物质取代,从而使生物分子与树脂解离。
阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质,所以这类蛋白质被留在柱子上,然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施,将吸附在柱子上的蛋白质洗脱下来。结合较弱的蛋白质首先被洗脱下来。
【答案】:酸性氨基酸先被洗脱。阳离子交换柱层析是一种用阳离子交换树脂作支持剂的层析法。阳离子交换树脂上含有酸性或碱性基团可以解离出氢离子,与溶液中的阳离子发生交换。
因此,碱性氨基酸通常是洗脱顺序中的最后一个被洗脱的氨基酸。阳离子交换层析氢基酸的洗脱顺序是疏水性复基酸、酸性氨基酸、中性氨基酸和碱性氨基酸。根据这一顺序,可以优化每基酸的分离效果,提高纯化的效率。
4、执业药师考试综合辅导:离子交换层析法(3)
在某些实验条件下,离子交换层析的洗脱,也选用阶梯式或复合式梯度洗脱液。实践中采用何种形式的梯度洗脱,完全决定于分离要求,无规律可循。一般从线性梯度开始,然后逐步摸索试验,以获得适用于实验的合适洗脱方式。
离子交换法适用于酸性、碱性或两性成分的分离,即要求被分离物质在水(或酸水,或碱水)溶液中呈解离状态。根据被分离物质呈解离状态时所带电荷的性质,可选择阴离子交换树脂或阳离子交换树脂。
根据抗原分子电荷不同进行分离纯化的方法为离子交换层析法。
离子交换层析法大致分为5个步骤: 离子扩散到树脂表面。 离子通过树脂扩散到交换位置。 在交换位置进行离子交换;被交换的分子所带电荷愈多,它与树脂的结合愈紧密,也就愈不容易被其它离子取代。
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