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  1. 用强酸性阳离子交换树脂分离氨基酸混合物时,为什么要逐步提高洗脱液的pH...

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不同的氨基酸(带的电荷不同)与树脂的亲和力不同,要将其分离洗脱下来,需要降低它们之间的亲和力,方法是逐步提高洗脱剂的pH和盐浓度,这样各种氨基酸将以不同的速度被洗脱下来,反之亦然。

反之阳离子交换基质结合带有正电荷的蛋白质,结合的蛋白可以通过逐步增加洗脱液中的盐浓度或是提高洗脱液的pH值洗脱下来。

本实验用磺酸阳离子交换树脂分离酸性氨基酸(天冬氨酸)、中性氨基酸(丙氨酸)碱性氨基酸(赖氨酸)的混合液。在特定的pH条件下,它们解离程度不同,通过改变脱液的pH或离子强度可分别洗脱分离。

除了洗脱顺序外,还需考虑其他因素对阳离子交换层析的影响。例如,洗脱缓冲液的pH值、离子强度和浓度等,都会影响氨基酸与阳离子交换树脂的相互作用。此外,树脂的类型、粒径和容量等也会对分离效果产生影响。

通过调节酸度,可以控制生物分子与树脂的解离程度,从而实现有效的分离和纯化效果。酸性洗脱广泛应用于蛋白质、多肽、核酸等生物分子的分离和纯化。

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