大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于离子交换树脂分离蛋白实验报告的问题，于是小编就整理了5个相关介绍离子交换树脂分离蛋白实验报告的解答，让我们一起看看吧。

1. 求助离子交换柱纯化蛋白的问题
2. 怎样使用离子交换析法分离不同的蛋白质
3. 离子交换色谱的原理以及阴阳离子交换树脂的特性
4. 离子交换怎么试验
5. 如何用阴离子交换树脂层析分离混合氨基酸

1、求助离子交换柱纯化蛋白的问题

阴离子交换树脂含有季胺基[-N（CH3）3OH]、胺基（—NH2）或亚胺基（—NH2）等碱性基团。

蛋白与离子柱得结合太强，换弱阳的琼脂糖凝胶介质，比如由 sp 的换成 CM 减少离子柱与样品的结合时间，防止蛋白沉在柱上。 若洗不下来的是杂蛋白直接用 0.1M 氢氧化钠洗。

离子交换树脂固定床的床层压力会随着分离过程的进程而不断加大，需要重新填充。同时，也造成固定床填充过程操作麻烦，而且密封性要求高。

离子交换柱层析法的核心在于不同的蛋白质的等电点不同 所以说，利用离子交换柱层析法分离不同的蛋白质其实就是利用不同蛋白质不同的等电点来分离。

对具体离子交换纯化，需要主要离子交换剂的选择和处理。

2、怎样使用离子交换析法分离不同的蛋白质

所以说，利用离子交换柱层析法分离不同的蛋白质其实就是利用不同蛋白质不同的等电点来分离。

离子交换内的介质一般是树脂，阳离子交换型的，使用前树脂先用碱处理成钠型，将氨基酸混合液（pH=2-3）上柱，pH=2-3时，氨基酸主要以阳离子形式存在，与树脂上的钠离子发生交换而被“挂”在树脂上，再用洗脱剂洗脱。

离子交换层析分离蛋白质是根据在一定pH 条件下，蛋白质所带电荷不同而进行的分离方法。

离子交换层析法：利用不同的蛋白质在缓冲溶液中所带电荷不同，与某一载体上的具有相反电荷的离子基团进行吸附，然后进行解脱，达到纯化蛋白质目的。常用载体：纤维素DEAE，带正电，吸附带负电的Alb、α、β球蛋白。

由于蛋白质也有等电点，当蛋白质处于不同的pH条件下，其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质，所以这类蛋白质被留在柱子上，然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施，将吸附在柱子上的蛋白质洗脱下来。

3、离子交换色谱的原理以及阴阳离子交换树脂的特性

强酸性树脂的离解能力很强，在酸性或碱性溶液中均能离解和产生离子交换作用。树脂在使用一段时间后，要进行再生处理，即用化学药品使离子交换反应以相反方向进行，使树脂的官能基团回复原来状态，以供再次使用。

这些都是常规高交换容量的离子交换树脂，由于它们的传质速度低，使柱效和分离速度都低。

离子交换色谱（ion exchange chromatography，IEC）以离子交换树脂作为固定相，树脂上具有固定离子基团及可交换的离子基团。当流动相带着组分电离生成的离子通过固定相时，组分离子与树脂上可交换的离子基团进行可逆变换。

阴阳离子交换树脂工作原理：离子交换是带电粒子或离子的可逆交换与相同电荷的交换。当存在于不溶性阴阳离子交换树脂树脂基质上的离子有效地与周围溶液中存在的类似电荷的离子交换位置时，会发生这种情况。

阴离子交换树脂含有季胺基[-N（CH3）3OH]、胺基（—NH2）或亚胺基（—NH2）等碱性基团。它们在水中能生成OH-离子，可与各种阴离子起交换作用，其交换原理为 R—N（CH3）3OH＋Cl- R—N（CH3）3Cl＋OH-。

4、离子交换怎么试验

向各管中加入20 mL氯化钡溶液，用玻棒搅拌4 min后，以3000r/min转速离心至下层土样紧实为止。弃去上清液，再加20 mL氯化钡溶液，重复上述操作。在各离心管内加20 mL蒸馏水，用玻棒搅拌1 min后，离心沉降，弃去上清液。

火焰试验法：将待检测样品溶解于水中，然后将鉴定棒浸入样品中，取出后置于火焰中加热，如果存在钠离子，则火焰会呈现出黄色光芒。 离子交换法：利用离子交换树脂，通过对待检测样品的离子交换实现钠离子的检验与分离。

在某些实验条件下，离子交换层析的洗脱，也选用阶梯式或复合式梯度洗脱液。实践中采用何种形式的梯度洗脱，完全决定于分离要求，无规律可循。一般从线性梯度开始，然后逐步摸索试验，以获得适用于实验的合适洗脱方式。

如果反应向右进行，Ca2 是解吸过程，而Na 是吸附过程。所以，阳离子交换实际上是一个吸附—解吸过程。Na 、Ca2 的交换是一种最广泛的阳离子交换。

试验步骤 1取样按GB/T 5475—1985《离子交换树脂取样方法》进行。2试样的预处理按GB/T 5476—1996《离子交换树脂预处理方法》进行。需要将树脂转为某一型态时，可将相应的电解质溶液通过上述预处理后的样品。

5、如何用阴离子交换树脂层析分离混合氨基酸

离子交换层析分离蛋白质是根据在一定pH 条件下，蛋白质所带电荷不同而进行的分离方法。常用于蛋白质分离的离子交换剂有弱酸型的羧甲基纤维。

方法是：于各管洗脱液中加10滴pH5醋酸缓冲液和10滴中性茚三酮溶液，沸水浴中煮10min，如溶液呈紫蓝色，表示已有氨基酸洗脱下来。显色的深度可代表洗脱的氨基酸浓度，可比色测。

离子交换层析法大致分为5个步骤：离子扩散到树脂表面。离子通过树脂扩散到交换位置。在交换位置进行离子交换；被交换的分子所带电荷愈多，它与树脂的结合愈紧密，也就愈不容易被其它离子取代。

离子交换层析是利用蛋白质在不同PH带不同种电荷的方法，利用离子交换的方法分离蛋白的。

到此，以上就是小编对于离子交换树脂分离蛋白实验报告的问题就介绍到这了，希望介绍关于离子交换树脂分离蛋白实验报告的5点解答对大家有用。