离子交换树脂提取蛋白质,离子交换树脂提取生物碱的原理
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1、离子交换柱层析原理是什么?
离子交换层析法是从复杂的混合物中,分离性质相似大分子的方法之一,依据的原理是物质的酸碱性,极性,所带阴阳离子的不同。
电荷不同的物质,对管柱上的离子交换剂有不同的亲和力,改变冲洗液的离子强度和pH值,物质就能依次从层析柱中分离出来。
层析开始前,功能基团与反离子稳定结合,就与反离子发生可逆交换,与层析剂结合被固定下来。
因为盐离子可以与底物竞争功能基团,盐浓度越高样品与层析剂结合越不紧密,易被洗脱下来。
不同物质与层析剂结合程度不同,洗脱下来的时间不同,因此得以分开。
离子交换剂的选择首重保持欲分离物质的生物活性,以及在不同pH值环境中,此物质所带的电荷和电性强弱,阴阳离子交换剂的选择若被分离物质带正电荷,这些碱性蛋白质,它们在酸性溶液中较稳定,亲和力强,故采用阳离子交换剂。
在碱性溶液中较稳定,则使用阴离子交换剂,如果欲分离的物质是两性离子,一般考虑在它稳定的pH范围带有何种电荷,作为交换剂的选择。
离子交换剂的再生与保存离子交换剂可在柱上再生,若有脂溶性物质则可用非离子型去污剂洗柱后再生,也可用乙醇洗涤。
离子交换柱层析原理是一种基于离子交换的层析技术,利用离子交换树脂作为分离介质,将样品中的离子根据其电荷、大小和化学性质与树脂上的离子进行竞争吸附和解吸,从而实现离子的分离和纯化。
通过控制柱层析的条件,如树脂种类、流速、pH值等,可以实现对不同离子的选择性分离和富集,具有广泛的应用价值,如水质监测、药物分析、生化分析等领域。
离子的半径电荷等差异会影响它在离子交换柱上的移动速度,进而实现层析。
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