阳离子交换树脂柱效-阳离子树脂交换原理
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1、如何进行阳离子交换柱层析的洗脱?
以下是洗脱的一般步骤:先用非极性溶剂洗,一般使用石油醚,实验室合成的产物都是极性比较大的,所以洗不出来,在产物中的大分子类似于色素的东西也不会出来。
将梯度洗涤仪和层析柱连接,洗脱瓶A(混合器)加200l缓冲液,开口打开至两瓶液面相平,相通管道出无气泡,关闭连接,A中加入6gNaCl溶解,把装置放在梯度混合仪上,开动搅拌器开关,打开A和B的连接通道,层析柱下端连收集器,收集洗脱流出液。6) 控制流速,约4min/管,2-3ml/管。
疏水性氨基酸的洗脱顺序 在阳离子交换层析中,疏水性氨基酸(如亮氨酸、异亮氨酸、频氨酸等)往往具有较强的亲水性,因此它们在洗脱过程中。较容易被固定相吸附,难以从固定相中洗脱出来。因此,疏水性氨基酸通常是洗脱顺序中的第一个被洗脱的氨基酸。
离子交换内的介质一般是树脂,阳离子交换型的,使用前树脂先用碱处理成钠型,将氨基酸混合液(pH=2-3)上柱,pH=2-3时,氨基酸主要以阳离子形式存在,与树脂上的钠离子发生交换而被“挂”在树脂上,再用洗脱剂洗脱。
首先,预处理一般就是看你树脂的类型。阳树脂一般用盐酸处理,阴树脂一般用NaOH处理。处理过后用去离子水洗至中性后可以装柱。一般都是用反洗的方法,使装柱过程不在树脂内部不产生气泡。
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